郭毅　贾心善　刘树立　李奕　赵德成　高苏　莲井和久

摘　要　目的：探讨cd44s和cd44v6在胃淋巴瘤中的表达特征及其临床意义。 cd20、cd44s和cd44v6的免疫组化法观察47例胃淋巴瘤。结果：cd44s在低度恶性胃淋巴瘤中的阳性率为27%，高度恶性为62%，差异显著（p=0.02)；cd44v6在低度胃淋巴瘤中的阳性率为6%；高度恶性为38%，差异显著(p=0.01)。cd44s在临床i期的阳性率为30%，ii～ⅳ期为75%，差异显著(p=0.002)。结论：cd44s和cd44v6的表达与胃淋巴瘤的恶性程度相关，而且随着临床分期的进展，cd44s的表达增强。

关键词：胃淋巴瘤　粘膜相关组织淋巴瘤　粘附分子　病理学

虽然胃是最常见的结外淋巴瘤发生部位之一，原发性胃淋巴瘤的发病率相对较低，仅占胃恶性肿瘤的1%～7%。自从1983年isaacson和wright首次提出粘膜相关淋巴组织的低度恶性b-细胞淋巴瘤（mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma， maltoma)以来，其观点已被广泛接受，而且许多高度恶性淋巴瘤可能来自低度恶性的粘膜相关淋巴组织病变［1］。cd44是一种分布极为广泛的表面跨膜糖蛋白，属于表面粘附分子，cd44具有介导淋巴细胞与血管内皮结合，使淋巴细胞穿过血管壁返回淋巴组织的功能，所以又称归巢受体。cd44是淋巴细胞执行生物学功能的重要分子，亦参与肿瘤发生发展多个环节［2］。我们研究了cd44s和cd44v6在胃淋巴瘤中的表达并讨论其意义。

1　材料与方法

1.1　材料　47胃淋巴瘤标本来自中国医科大学第一、第二临床学院、辽宁省肿瘤医院、沈阳市第二医院、第八医院。时间从1979年1月～1999年6月；男性为26例，女性21例。平均年龄为49岁（从19岁～72岁）。正常淋巴结标本来自常规手术切除的组织。标本用10%甲醛固定、石蜡包埋。组织切片常规he染色。淋巴瘤的细胞来源用cd3和cd20单抗鉴定，根据who（1997年草案）新分类。依据修改后的ann arbor分期标准行临床分期：ⅰ期为淋巴瘤局限于胃壁；ⅱ期为侵袭局部淋巴结；ⅲ期为累积远隔淋巴结；ⅳ期为累积骨髓或其它非淋巴器官。

1.2　实验方法　免疫组化染色s-p法，石蜡切片厚4μm。cd44s和cd44v6分别按1∶50和1∶100稀释，购于中山公司。其余步骤按s-p盒要求进行，用高压锅进行抗原修复，dab显色，苏木素复染、封片。对照：以0.01 mol/l pbs置换一抗作空白对照，用已知阳性切片作阳性对照。以细胞膜棕黄色淋巴瘤细胞＞20%定为阳性。

1.3　统计分析　应用sas软件进行χ2检验。

2　结果

2.1　胃淋巴瘤的分类

47例胃淋巴瘤中，cd20阳性的为b-细胞来源。其中18例为低度恶性（低恶度malt淋巴瘤10例，淋巴浆细胞样淋巴瘤8例），29例为高度恶性(高度恶性malt瘤15例，弥漫性b-大细胞样淋巴瘤12例及2例cd3阳性的t细胞淋巴瘤)。

2.2　cd44s和cd44v6在胃淋巴瘤中的表达

cd44s在正常淋巴结中可有表达，其中滤泡套细胞和生发中心细胞阳性，cd44v6在正常淋巴结无表达。47例胃淋巴瘤中cd44s和cd44v6的阳性率分别为49%和25.5%。表达强度与组织类型相关，cd44s在低度恶性胃淋巴瘤低表达（27%），在高度恶性胃淋巴瘤高表达（62%），差异显著（p=0.02）。cd44v6在高度恶性胃淋巴瘤表达相对较高（38%），而在低度恶性胃淋巴瘤其阳性率只有5%（p=0.01）。cd44s的表达强度随着临床分期的进展而增高，而cd44v6的表达强度虽有这种趋势，但差异不明显。cd44s和cd44v6在胃淋巴瘤中的表达强度有随着瘤细胞浸润深度而增加的趋势，但无统计学意义。

3　讨论3.1　胃肠道则是结外淋巴瘤最多见的部位，而胃则又是胃肠道淋巴瘤中最好发的部位。长期以来，胃淋巴瘤虽然有一些与其它部位淋巴瘤不同的特点，但未引起特别的关注，随着malt概念被广泛接受及其与幽门螺杆菌关系的研究，引起了对胃淋巴瘤的病因、病理、诊断、治疗等一系列理论和实践上的新认识。本文依据淋巴瘤who分类（草案），对47例胃淋巴瘤进行了分类，其中低度恶性18例，高度恶性29例；malt淋巴瘤占25例，是原发性胃淋巴瘤的主要类型。

3.2　cd44家族在淋巴细胞的形成和激活过程中起着重要作用，因为淋巴细胞的增生异常表明淋巴细胞的发育过程的中断，已经应用cd44作为评价淋巴瘤的恶性度和预后指标［3］。本实验进一步表明cd44s和cd44v6的表达与胃淋巴瘤的恶性程度的呈正相关，cd44v6表现更明显，cd44v6可以作为判定胃淋巴瘤恶性程度的重要指标。淋巴细胞粘附分子参与淋巴细胞与血管内皮的粘附，使淋巴细胞从血液循环中逸出。淋巴细胞上的这些分子称为淋巴细胞归巢受体，其不但在正常的淋巴细胞的游走中起重要作用，而且影响恶性淋巴瘤的播散［4］。所以cd44s和cd44v6作为评价胃淋巴瘤的恶性程度的指标，并且cd44s与胃淋巴瘤的分期相关。有迹象表明高度恶性malt淋巴瘤来源于低度恶性malt淋巴瘤。激活的淋巴细胞和淋巴瘤的侵袭有许多相似之处，表现为细胞过度增殖，分泌细胞因子，改变细胞间的粘连特点。在体外培养的t、b细胞中加入抗cd44v6抗体可以抑制淋巴细胞的激活［5］，说明cd44在淋巴细胞的恶性转化中起着重要作用。在用cd44v6 cdan和cd44s　cdan转染非转移性大鼠胰腺癌细胞系后获得两种转染体细胞，结果观察到cd44v6转染体接种裸鼠后可成瘤，并可出现淋巴结和肺转移，从而直接证明cd44v6参与肿瘤转移［6］。对cd44功能的进一步分析可以更深入地了解肿瘤的转化和对特异器官的浸润。